摘要：目的研究慢病毒介導(dǎo)弓形蟲效應(yīng)分子ROP16 Ⅰ/Ⅲ( Toxo ROP16 Ⅰ/Ⅲ)經(jīng)旁路途徑誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞RAW264.7(Mφ)向M2型巨噬細(xì)胞偏移(M2),抑制經(jīng)典途徑激活巨噬細(xì)胞(M1)炎性因子的產(chǎn)生。方法構(gòu)建表達(dá)ROP16 Ⅰ/Ⅲ的重組慢病毒,轉(zhuǎn)染Mφ,通過激活旁路途徑向M2型細(xì)胞偏移。脂多糖(LPS)誘導(dǎo)Mφ通過經(jīng)典途徑向M1型巨噬細(xì)胞細(xì)胞偏移。M1和M2細(xì)胞進(jìn)行混合培養(yǎng)。用qRT-PCR檢測TNF-α、IL-1β、TGF-β1、IL-10、誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)和精氨酸酶1(Arg-1)的表達(dá)。Western blot檢測ROP16 Ⅰ/Ⅲ、iNOS、Arg-1和PD-L2的蛋白表達(dá)。結(jié)果構(gòu)建ROP16 Ⅰ/Ⅲ重組慢病毒并成功穩(wěn)轉(zhuǎn)Mφ,觀察可見綠色熒光表達(dá);Arg-1、PD-L2蛋白和TGF-β1、IL-10、Arg-1的mRNA表達(dá)升高,表明ROP16 Ⅰ/Ⅲ誘導(dǎo)了M2的偏移。LPS刺激后, qRT-PCR檢測巨噬細(xì)胞的TNF-α和IL-1β mRNA表達(dá)上調(diào),iNOS mRNA和蛋白表達(dá)同時(shí)升高,顯示M1表型細(xì)胞特征。在M1和M2細(xì)胞混合培養(yǎng)中,M1型細(xì)胞分泌的上述促炎因子表達(dá)顯著降低。結(jié)論 Toxo ROP16 Ⅰ/Ⅲ可驅(qū)動(dòng)巨噬細(xì)胞向M2型偏移,能明顯下調(diào)M1型細(xì)胞分泌炎性細(xì)胞因子。