從致倦庫(kù)蚊和騷擾阿蚊標(biāo)本中分離寨卡病毒的比較研究

摘要：由不同蚊蟲分離到的寨卡病毒的生物學(xué)表型研究未見報(bào)道。本研究首次對(duì)從致倦庫(kù)蚊和騷擾阿蚊中分離的兩株寨卡病毒進(jìn)行生物學(xué)表型及病毒分子特征開展研究。分別觀察兩株病毒在多種組織培養(yǎng)細(xì)胞中的致病變效應(yīng)、空斑形成及病毒滴度等,并對(duì)兩株病毒基因序列進(jìn)行分子遺傳分析。結(jié)果顯示,致倦庫(kù)蚊分離株(GZDJ1685)在BHK-21細(xì)胞、C6/36細(xì)胞和Vero細(xì)胞中的病變時(shí)間分別為48h、48h和144h;而騷擾阿蚊分離株(GZDJ1666-2)在BHK-21細(xì)胞中的病變時(shí)間為144h,該毒株不引起Vero細(xì)胞和C6/36細(xì)胞病變。兩毒株均可在BHK-21細(xì)胞中形成空斑。GZDJ1685毒株在BHK-21細(xì)胞、C6/36細(xì)胞和Vero細(xì)胞中的擴(kuò)增滴度分別為104.2PFU/mL、105.17 PFU/mL和104.6 PFU/mL,而GZDJ1666-2毒株在以上3種細(xì)胞中的擴(kuò)增滴度分別為103.5 PFU/mL、105.49 PFU/mL和106.08PFU/mL。病毒分子遺傳系統(tǒng)進(jìn)化分析發(fā)現(xiàn),GZDJ1685和GZDJ1666-2毒株處于共同的進(jìn)化分支,均屬于亞洲Ⅱ型寨卡病毒。寨卡病毒編碼區(qū)氨基酸位點(diǎn)分析提示,GZDJ1685和GZDJ1666-2毒株在結(jié)構(gòu)基因的氨基酸位點(diǎn)(S139N、D683E、V763M、T777M)和非結(jié)構(gòu)基因NS1基因的(A188V)變異與從埃及伊蚊和寨卡病毒感染患者分離的病毒完全相同。研究結(jié)果提示,雖然從致倦庫(kù)蚊和騷擾阿蚊分離的寨卡病毒株對(duì)組織培養(yǎng)細(xì)胞致病變作用和病毒滴度存在巨大差異,但從致倦庫(kù)蚊和騷擾阿蚊分離的寨卡病毒株均具備與2016年以來在南美洲流行的寨卡病毒相同的分子基礎(chǔ)。