摘要：DNA條形碼(DNA barcoding)技術(shù)是一種利用生物基因組內(nèi)短遺傳標(biāo)簽進(jìn)行分類鑒定的方法.桑黃自古以來(lái)是一種名貴中藥材,而市售桑黃主要依托簡(jiǎn)單的形態(tài)鑒定造成混淆眾多.近年來(lái)大量研究表明,桑黃類真菌種類至少有7個(gè)種,并且其藥效也不盡相同.【目的】為更準(zhǔn)確、高效對(duì)桑黃類真菌進(jìn)行鑒定,本研究以采集自西藏、吉林和浙江的3種桑黃子實(shí)體為材料,篩選最佳DNA條形碼與相應(yīng)PCR條件.【方法】利用組織分離獲得3種桑黃純培養(yǎng)菌株,分別編號(hào)為1713、1714和HS菌株.利用ITS、NL、rpb1、rpb2和ef1-α等7組DNA條形碼分別對(duì)3種桑黃進(jìn)行PCR擴(kuò)增、測(cè)序、比對(duì)和發(fā)育樹(shù)分析,并結(jié)合形態(tài)學(xué)特征,確定其最適DNA條形碼和分類學(xué)地位.【結(jié)果】結(jié)果表明,ITS和NL條形碼對(duì)3種桑黃均能夠獲得單一目的條帶;rpb1Y、rpb2B和rpb2Y條形碼特異性低,擴(kuò)增后獲得多個(gè)條帶;而rpb1B和ef1-α條形碼均無(wú)法獲得條帶.通過(guò)多序列比對(duì),結(jié)合形態(tài)分析,確定1713菌株為桑黃纖孔菌(Inonotus sanghuang),而1714和HS菌株均為鮑姆纖孔菌(Inonotus baumii).【結(jié)論】本研究確定ITS和NL為桑黃分子鑒定的最佳DNA條形碼,其PCR最適退火溫度范圍分別為58~59℃和49~50℃,為桑黃真菌快速鑒定提供參考依據(jù).