摘要：富含甘氨酸的RNA結(jié)合蛋白AtGrp7是擬南芥(Arabidopsis thaliana)調(diào)節(jié)生物鐘負(fù)反饋回路的組分.在使用常規(guī)方法純化AtGrp7 RRM結(jié)構(gòu)域的初始試驗(yàn)中,觀察到煙草蝕紋病毒(TEV)酶切后AtGrp7 RNA識別基序(RRM)結(jié)構(gòu)域的紫外吸收峰為蛋白和雜質(zhì)的混合信號峰.為解決常規(guī)純化中的雜質(zhì)問題,對AtGrp71-90應(yīng)用了變性-復(fù)性兩步純化方法.AtGrp7 RRM結(jié)構(gòu)域的1H-15N HSQC指紋譜和CS-Rosetta模型結(jié)構(gòu)表明快速稀釋重折疊后其結(jié)構(gòu)完全恢復(fù).等溫滴定量熱法(ITC)和核磁共振(NMR)滴定實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步證實(shí),重折疊后AtGrp71-90 RRM結(jié)構(gòu)域具有正確結(jié)合RNA/DNA的功能.