摘要：為了深入研究紫花苜蓿(Medicago sativa)MsLEA4基因的功能,本試驗(yàn)采用染色體步移技術(shù)從紫花苜蓿基因組中擴(kuò)增出MsLEA4啟動(dòng)子序列,構(gòu)建GUS植物超表達(dá)載體,并根據(jù)序列分析結(jié)果對(duì)紫花苜蓿進(jìn)行相應(yīng)逆境脅迫。結(jié)果表明:紫花苜蓿MsLEA4啟動(dòng)子含有響應(yīng)脫落酸(abscisic acid,ABA)調(diào)控的順式作用元件ABRE,響應(yīng)赤霉素(gibberellin,GA)調(diào)控的順式作用元件P-box,參與胚乳合成的順式作用元件GCN4和Skn-1,以及涉及光調(diào)控和光周期的順式作用元件;外源ABA、GA、持續(xù)光照以及黑暗均能誘導(dǎo)MsLEA4基因的表達(dá);GUS基因只在擬南芥花和莢果中表達(dá)。因此,MsLEA4基因能參與紫花苜蓿的逆境調(diào)控,與該基因啟動(dòng)子序列中所含的一系列順式作用元件相關(guān)。本研究為進(jìn)一步探索MsLEA4基因在紫花苜蓿逆境脅迫、光調(diào)控以及組織特異性表達(dá)中的作用奠定了基礎(chǔ)。