摘要：研究通過分子生物學(xué)方法證明TaDREB3a基因已整合至大豆基因組中,對(duì)T1~T3連續(xù)3代大豆植株作篩選鑒定并分析遺傳穩(wěn)定性,初步評(píng)價(jià)室內(nèi)和田間抗旱表現(xiàn)。通過除草劑篩選獲得T1代135株抗性植株,經(jīng)PCR檢測(cè)其中96株擴(kuò)增出基因目的條帶,獲得15個(gè)陽性TaDREB3a過表達(dá)大豆T1代株系;T2代轉(zhuǎn)基因大豆株系經(jīng)PEG模擬干旱處理和PCR鑒定獲得陽性TaDREB3a過表達(dá)大豆T2代株系共10個(gè);T3代轉(zhuǎn)基因大豆株系經(jīng)PCR鑒定、半定量PCR鑒定、Bar基因試紙條檢測(cè)、Southern blot分析、Western blot分析,獲得6個(gè)轉(zhuǎn)基因陽性株系,證實(shí)TaDREB3a基因已整合于大豆基因組,可轉(zhuǎn)錄完整目的mRNA,其中4個(gè)株系檢測(cè)到目的蛋白表達(dá)。盆栽干旱試驗(yàn)顯示,TaDREB3a過表達(dá)可改善轉(zhuǎn)基因大豆干旱條件下生長(zhǎng)狀況,轉(zhuǎn)基因植株株高和莢數(shù)明顯優(yōu)于對(duì)照組植株;大田干旱試驗(yàn)結(jié)果顯示,TaDREB3a過表達(dá)株系提高大豆抗旱性、改善干旱條件下地上形態(tài),減少產(chǎn)量損失。