轉TaDREB3a基因大豆材料抗旱性鑒定

摘要：研究通過分子生物學方法證明TaDREB3a基因已整合至大豆基因組中,對T1~T3連續3代大豆植株作篩選鑒定并分析遺傳穩定性,初步評價室內和田間抗旱表現。通過除草劑篩選獲得T1代135株抗性植株,經PCR檢測其中96株擴增出基因目的條帶,獲得15個陽性TaDREB3a過表達大豆T1代株系;T2代轉基因大豆株系經PEG模擬干旱處理和PCR鑒定獲得陽性TaDREB3a過表達大豆T2代株系共10個;T3代轉基因大豆株系經PCR鑒定、半定量PCR鑒定、Bar基因試紙條檢測、Southern blot分析、Western blot分析,獲得6個轉基因陽性株系,證實TaDREB3a基因已整合于大豆基因組,可轉錄完整目的mRNA,其中4個株系檢測到目的蛋白表達。盆栽干旱試驗顯示,TaDREB3a過表達可改善轉基因大豆干旱條件下生長狀況,轉基因植株株高和莢數明顯優于對照組植株;大田干旱試驗結果顯示,TaDREB3a過表達株系提高大豆抗旱性、改善干旱條件下地上形態,減少產量損失。