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    首頁 > 期刊 > 自然科學與工程技術 > 農業科技 > 農作物 > 大豆科學 > 利用GUS基因的瞬時表達優化大豆根癌農桿菌介導的遺傳轉化 【正文】

    利用GUS基因的瞬時表達優化大豆根癌農桿菌介導的遺傳轉化

    楊明明; 高海京; 馬嘯燕; 孫英楠; 邵宇鵬; 包格格; 李文濱; 王志坤 東北農業大學大豆生物學教育部重點實驗室/農業部東北大豆生物學與遺傳育種重點實驗室; 黑龍江哈爾濱150030
    • 根癌農桿菌
    • 大豆遺傳轉化
    • 轉化率
    • gus基因瞬時表達

    摘要:高轉化效率是分子育種的重要前提,根癌農桿菌介導的遺傳轉化由于其有較高的遺傳效率和較低的拷貝數成為目前優選方法。為優化大豆遺傳轉化體系,以本實驗室已有轉化體系為基礎,利用pCAMBIA3301中35S∶GUS基因瞬時表達體系,從萌發時間、切豆方法、侵染時間、共培養方式以及共培養時間等方面對東農47、墾農18和B12088大豆栽培品種的遺傳轉化體系進行優化。結果表明:東農47萌發1d,侵染30 min;墾農18和B12088萌發12h,侵染30min,GUS基因瞬時表達率最高。在其它的處理上,3個品種表現結果一致,即蘸取菌液切豆,共培養中子葉傷口朝下擺放,黑暗條件下共培養3~5 d,GUS基因瞬時表達最高。3個品種在最適條件下,GUS染色效率均達到90%以上,墾農18遺傳轉化效率較高。本研究為大豆農桿菌介導子葉節轉化方法提供了一個改進的方案,并且為拓寬可利用于大豆遺傳轉化的種質資源奠定基礎。

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