首頁 > 期刊 > 自然科學與工程技術 > 農業科技 > 農業綜合 > 廣東海洋大學學報 > 半滑舌鰨gata5基因的克隆及表達分析 【正文】
摘要:【目的】研究半滑舌鰨(Cynoglossus semilaevis)gata5基因(csgata5)的序列特征及該基因在半滑舌鰨性腺分化、成熟過程中的表達模式。【方法】通過克隆獲得csgata5編碼區序列,利用熒光定量PCR(RT-qPCR)方法檢測csgata5 mRNA在不同類型性腺、胚胎和性腺發育中的表達模式,借助原位雜交技術定位csgata5 mRNA表達的細胞類型。【結果】克隆獲得csgata5 cDNA序列1 777 bp,包含1 167 bp的編碼區(Coding sequence,CDS),262 bp的5′UTR和348 bp的3′UTR區,預測csgata5編碼388個氨基酸殘基(aa),分子質量為41.9 ku,等電點為8.90,在C端含有兩個典型的GATA鋅指結構域;基因組分析顯示csgata5位于半滑舌鰨10號染色體上,包含7個外顯子和6個內含子區。RT-qPCR分析顯示csgata5 mRNA在2齡雄魚和偽雄魚精巢中表達高于卵巢;csgata5m RNA主要定位在卵母細胞、精原細胞和精子中。胚胎發育過程中,csgata5m RNA表達在1細胞期至囊胚期呈下降趨勢,之后上升,至原腸胚期達到峰值,隨后降低并維持較低水平至孵化出膜。在精巢發育過程中,csgata5m RNA表達水平呈升高趨勢,在1齡達到檢測的峰值;在卵巢發育過程中,csgata5m RNA表達趨勢類似精巢,表達水平低于同期精巢。【結論】csgata5參與半滑舌鰨原腸胚期的組織器官分化,具有促進原始生殖細胞向雄性生殖細胞分化及雄性生殖細胞發育的作用。
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