馬氏珠母貝TRACP基因的克隆及組織表達

摘要：【目的】克隆馬氏珠母貝(Pinctada martensii)抗酒石酸酸性磷酸酶(Tartrate resistant acid phosphatase,TRACP)基因,分析該基因在不同組織中的表達模式。【方法】用RACE技術克隆得馬氏珠母貝TRACP基因(PmTRACP),用實時熒光定量PCR分析該基因在外套膜、閉殼肌、足、性腺、珍珠囊、肝胰腺和鰓中的表達。【結果與結論】PmTRACP基因長度為2 034 bp,開放式閱讀框972 bp,編碼323個氨基酸,5′UTR長度為27 bp,3′UTR長度為1 035 bp。預測PmTRACP分子質量約為36.39 ku,理論等電點為5.97。該基因含有一個鈣調神經磷酸酶樣磷酸酯酶結構域。PmTRACP與其他物種TRACP的同源性為48%~65%,與長牡蠣(Crassostrea gigas)TRACP的同源性最高,同時D^32、D^70、Y^73、N^108、H^203、H^212、H^237、H^239等8個氨基酸活性位點和N^114糖基化位點在不同物種TRACP中高度保守。PmTRACP與長牡蠣TRACP的親緣關系最近。PmTRACP在馬氏珠母貝各個組織均有表達,且在肝胰腺和珍珠囊中高表達。