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    惡性瘧原蟲MAL13P1.129基因的抗原表位預(yù)測及免疫學(xué)分析

    陳勤; 張國慶; 徐馀信; 沈玉娟; 官亞宜; 馮曉平; 曹建平; 湯林華 中國疾病預(yù)防控制中心寄生蟲病預(yù)防控制所; 衛(wèi)生部寄生蟲病原與媒介生物學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室; 世界衛(wèi)生組織瘧疾、血吸蟲病和絲蟲病合作中心; 上海200025
    • 惡性瘧原蟲
    • 抗原表位預(yù)測
    • 大腸桿菌
    • 基因表達(dá)

    摘要:目的對惡性瘧原蟲MAL13P1.129基因的抗原表位進(jìn)行預(yù)測,表達(dá)其重組蛋白并進(jìn)行免疫學(xué)鑒定。方法利用生物信息學(xué)分析方法對MAL13P1.129基因的線性抗原表位進(jìn)行預(yù)測,從親水性、表面可及性、柔韌性及二級結(jié)構(gòu)等方面對抗原表位進(jìn)行篩選。人工合成經(jīng)密碼子優(yōu)化的MAL13P1.129基因,構(gòu)建至PET32a(+)表達(dá)載體,獲得PET32a129表達(dá)質(zhì)粒,熱激轉(zhuǎn)化至宿主菌Rosettagami(DE3)中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá),分別用抗His-標(biāo)記的IgG及惡性瘧患者的血清作Western印跡分析鑒定表達(dá)產(chǎn)物。結(jié)果MAL13P1.129基因具有2個(gè)潛在的抗原表位,分別位于氨基酸44~51、98~106。表達(dá)獲得的重組蛋白與His-標(biāo)記的IgG進(jìn)行Western印跡有反應(yīng)條帶,與惡性瘧患者血清無反應(yīng)條帶。結(jié)論MAL13P1.129蛋白具有2個(gè)抗原表位,其在大腸埃希菌中表達(dá)的重組蛋白能被His-標(biāo)記的IgG識別,但不能被惡性瘧患者血清識別。

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