基于無機載體的先交聯后吸附固定化脂肪酶的方法

摘要：目的:使用雙功能環氧交聯劑新戊二醇二縮水甘油醚和硅藻土載體固定化海洋脂肪酶,并探究固定化酶的酶學性質.方法:采用先交聯后吸附的方法固定化海洋脂肪酶,交聯和吸附分別進行單因素與正交實驗結合的實驗方案,并測定固定化酶的酶活力.結果:確定最佳交聯條件:pH5.5,溫度35℃,交聯劑質量分數0.5%,交聯時間2h;最佳吸附條件:溫度40℃,載體質量1.5g,吸附時間5h.在此工藝條件下,所制備的固定化脂肪酶活力為1.89μkat,酶活力回收率72.89%.與游離的脂肪酶相比,所制備的固定化脂肪酶具有更好的溫度、pH、儲存及操作穩定性.結論:基于環氧交聯劑新戊二醇二縮水甘油醚和硅藻土載體,進行先交聯后吸附固定化海洋脂肪酶的技術具有良好的工業應用前景.