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    解淀粉芽孢桿菌HE活性成分鑒定及抗菌特性分析

    夏京津; 陳建武; 宋懌; 劉永濤; 董靖; 吳峪楠; 艾曉輝 華中農(nóng)業(yè)大學(xué)水產(chǎn)學(xué)院; 湖北武漢430070; 中國水產(chǎn)科學(xué)研究院長江水產(chǎn)研究所; 湖北武漢430223; 中國水產(chǎn)科學(xué)研究院; 農(nóng)業(yè)農(nóng)村部水產(chǎn)品質(zhì)量安全控制重點(diǎn)實驗室; 北京100141
    • 解淀粉芽孢桿菌
    • 嗜水氣單胞菌
    • 脂肽類物質(zhì)
    • 抗菌作用

    摘要:為明確解淀粉芽孢桿菌(Bacillus amyloliquefaciens)HE發(fā)酵液中的活性成分及抗菌特性,根據(jù)解淀粉芽孢桿菌發(fā)酵液抑菌活性穩(wěn)定性,用PCR檢測脂肽合成相關(guān)的基因,再采用UPLC-Q-TOF-MS對活性物質(zhì)進(jìn)一步分析;用二倍稀釋法測定脂肽對嗜水氣單胞菌(Aeromonas hydrophila)的最小抑菌濃度(MIC)和最小殺菌濃度(MBC),并從顯微結(jié)構(gòu)上來探討其抗菌作用。穩(wěn)定實驗表明該菌株產(chǎn)生抑菌活性物質(zhì)對高溫、酸、堿和蛋白酶具有一定的耐受性;4對引物的擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)過克隆、測序和BLAST分析,表明解淀粉芽孢桿菌HE基因組含有ituA、fenB、sfP、mycB的脂肽合成相關(guān)基因;液質(zhì)聯(lián)用分析發(fā)現(xiàn)脂肽粗提物中含有Surfactin、Iturin和Fengycin這3類脂肽類抗生素;抑菌圈法測定抗菌脂肽對嗜水氣單胞菌的MIC和MBC均為137.97μg·mL-1;顯微特征表明脂肽可以導(dǎo)致嗜水氣單胞菌細(xì)胞膜塌陷和孔洞。該研究結(jié)果可為解淀粉芽孢桿菌活性代謝產(chǎn)物結(jié)構(gòu)鑒定和安全性評價提供參考。

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