二硫鍵氧化還原異構酶(DsbM)與轉錄調控因子(PA0056)的相互作用

摘要：二硫鍵氧化還原異構酶(disulfide oxidoreductase,DsbM)分布于原核細胞中,主要參與周質空間中膜蛋白的折疊.轉錄調控因子(lysR type transcriptional regulator,PA0056)是一類包含4個半胱氨酸的蛋白,當以氧化態形式存在時,可調控下游基因的轉錄,參與調節抗氧化或者抗藥性.本實驗室前期研究證明DsbM參與氨基糖苷類耐藥性的調節.關注銅綠假單胞菌中DsbM和PA0056之間的相互作用,分別構建了酵母雙雜交(yeast two-hybrid test)和雙分子熒光互補系統(bi-molecular fluorescence complementation, BiFC)的載體.通過酵母雙雜交實驗,發現DsbM和PA0056之間存在較強的蛋白質相互作用.通過BiFC實驗,發現共同轉化表達DsbM和PA0056載體的酵母中可觀察到強烈的黃色熒光,表明DsbM和PA0056可以發生相互作用.本研究為深入研究DsbM在銅綠假單胞菌耐氨基糖苷類抗生素耐藥機制奠定基礎.