利用酵母雙雜交技術(shù)篩選與CCDC58相互作用的蛋白

摘要：卷曲螺旋是存在于多種天然蛋白質(zhì)中的一種結(jié)構(gòu)域,涉及調(diào)節(jié)基因表達(dá),膜融合以及細(xì)胞分裂等多種重要的生物學(xué)功能.CCDC58是一種由人體宿主細(xì)胞編碼的蛋白質(zhì),含有卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域,由144個(gè)氨基酸組成,編碼CCDC58的基因定位于人類3號染色體上.目前對該蛋白的研究不是很多,它的具體作用機(jī)制及相關(guān)的互作蛋白并不清楚.本實(shí)驗(yàn)通過酵母雙雜交技術(shù),以CCDC58作為誘餌,在cDNA文庫中尋找與CCDC58相互作用的蛋白,最后通過反向驗(yàn)證篩選出5個(gè)可能有相互作用的蛋白.為了在體外進(jìn)一步確認(rèn)這種相互作用,本實(shí)驗(yàn)通過GST Pull-down實(shí)驗(yàn),最終確認(rèn)TP53BP2和CCDC58具有很強(qiáng)的相互作用.