首頁 > 期刊 > 自然科學與工程技術 > 醫藥衛生科技 > 醫藥衛生綜合 > 青島大學醫學院學報 > 椎間盤髓核細胞應力模型中Piezo1蛋白的表達 【正文】
摘要:目的探討新型機械激活性離子通道Piezo1蛋白在人椎間盤髓核細胞應力模型中的表達。方法將人椎間盤髓核細胞分成牽張應力組和牽張應力+Piezo1蛋白抑制劑組,構建人椎間盤髓核細胞體外培養-應力刺激模型,采用多通道細胞牽張應力加載系統FX-4000T處理髓核細胞,兩組均加載0、2、12、24、48h的周期性牽張應力。采用RT-PCR、Western-blot技術檢測兩組Piezo1的表達水平,應用激光共聚焦顯微鏡檢測Piezo1蛋白熒光的強弱。結果 RT-PCR結果顯示,牽張應力組給予2h周期性牽張應力時,Piezo1 mRNA表達較給予0h周期性牽張應力時增加,給予24h周期性牽張應力時Piezo1mRNA表達高于其他牽張應力作用時,而給予48h周期性牽張應力時較給予24h周期性牽張應力時降低,差異有顯著性(F=13.917,P〈0.05)。Western-blot結果顯示,牽張應力組給予2h周期性牽張應力時Piezo1蛋白表達較給予0h周期性牽張應力時略有增加,給予24h周期性牽張應力時Piezo1蛋白表達高于其他各組,而給予48h周期性牽張應力時Piezo1蛋白表達較給予24h周期性牽張應力時降低,差異有顯著性(F=12.781,P〈0.05)。牽張應力+Piezo1蛋白抑制劑組Piezo1mRNA及其蛋白表達均明顯小于牽張應力組。Piezo1蛋白表達于髓核細胞的細胞質與細胞核,熒光較強。結論人椎間盤髓核細胞中Piezo1蛋白穩定表達,并且與應力加載時間相關。
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