首頁 > 期刊 > 自然科學(xué)與工程技術(shù) > 農(nóng)業(yè)科技 > 農(nóng)業(yè)綜合 > 青島農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)·自然科學(xué)版 > 野生大豆鹽堿脅迫相關(guān)GsGAPC基因克隆及表達(dá)特性分析 【正文】
摘要:甘油醛-3-磷酸脫氫酶作為糖降解過程中重要的酶之一,在生物體的生命活動(dòng)及非生物脅迫應(yīng)答過程中發(fā)揮重要作用。本研究以耐鹽堿能力極強(qiáng)的野生大豆‘G07256’為材料,采用同源克隆的方法獲得了編碼野生大豆甘油醛-3-磷酸脫氫酶的基因全長,并命名為GsGAPC,其CDS區(qū)為1023bp,編碼340個(gè)氨基酸,是一個(gè)穩(wěn)定蛋白,不具有跨膜結(jié)構(gòu)域。通過蛋白二級結(jié)構(gòu)及三級結(jié)構(gòu)預(yù)測發(fā)現(xiàn),該蛋白二級結(jié)構(gòu)主要由α螺旋、β折疊、延伸鏈和無規(guī)則卷曲組成且三級結(jié)構(gòu)復(fù)雜。進(jìn)化樹分析發(fā)現(xiàn),野生大豆GsGAPC蛋白與大豆(G.max、NP_001240046.1)、綠豆(V.radiate、XP_014494377.1)、木豆(C.cajan、XP_020228078.1)、菜豆(P.vulgaris、XP_007163725.1)的同源性較近。蛋白保守結(jié)構(gòu)域分析顯示GsGAPC有3個(gè)保守結(jié)構(gòu)域,N-端結(jié)構(gòu)域,NAD結(jié)合結(jié)構(gòu)域和C端甘油醛-3-磷酸脫氫酶亞家族結(jié)構(gòu)域(Gp_dh_Csuperfamily)。實(shí)時(shí)熒光定量PCR分析發(fā)現(xiàn)GsGAPC在野生大豆的根、莖、葉、子葉中均表達(dá),且在根中表達(dá)量最高;鹽、ABA、MeJA處理后,GsGAPC在野生大豆的根中均上調(diào)表達(dá);而在葉中,4種脅迫處理后GsGAPC均顯著誘導(dǎo)表達(dá)。該結(jié)果暗示GsGAPC在野生大豆的根和葉中可能通過JA和ABA信號通路來響應(yīng)鹽堿脅迫。
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