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    用于篩查轉(zhuǎn)基因作物成分的質(zhì)粒標準分子的研制

    肖維威; 張寶; 趙衛(wèi); 朱利; 吳清華 南方醫(yī)科大學公共衛(wèi)生學院; 中國廣東廣州510515
    • 轉(zhuǎn)基因作物
    • 重疊延伸pcr
    • 質(zhì)粒標準分子

    摘要:為彌補傳統(tǒng)標準物質(zhì)的缺乏,構(gòu)建了一種可用于篩查轉(zhuǎn)基因作物成分的質(zhì)粒標準分子。首先,通過PCR擴增獲得454 bp的RBCL基因、236 bp的CaMV35S啟動子以及200 bp的NOS終止子目的片段,經(jīng)兩次重疊延伸PCR擴增將上述3個片段連接成849 bp的重組子。隨后,將該重組子克隆至pMD18-T載體,經(jīng)PCR擴增、測序分析后成功獲得陽性重組質(zhì)粒pMD-RBCL-CaMV35S-NOS。進一步的替代性研究顯示,該重組質(zhì)粒DNA與標準物質(zhì)基因組DNA的檢測分析結(jié)果一致。因此,該重組質(zhì)粒標準分子可作為陽性標準物質(zhì)用于轉(zhuǎn)基因作物成分的初步篩查檢測。

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