大腹園蛛主壺腹腺蛛絲蛋白末端結構域的克隆表達

摘要：牽引絲(dragline silk)由主壺腹腺蛛絲蛋白(major ampullate spidroin,MaSp)組成,是蜘蛛絲中強度最好的絲,同時具有極佳的生物相容性和可降解性,因此引起研究者的研究熱潮。目前關于大腹園蛛MaSp結構和成絲機理方面的研究甚少,限制了其仿生應用。本文以大腹園蛛牽引絲的組成蛋白質之一MaSp1為研究對象,通過錨定PCR的方法首次獲取了大腹園蛛MaSp1 NT的完整編碼基因,并對其進行了克隆、表達、純化,產量可達60 mg/L;同時對該MaSp1的CT進行表達純化,產量可達80 mg/L。另外,通過CD色譜分析了MaSp1 NT和CT的二級結構,結果表明二者的二級結構均以α-螺旋為主。上述結果為大腹園蛛MaSp1的結構和成絲機理研究奠定了基礎。