蛋白N-糖基化分析方法研究進展

摘要：糖基化是真核細(xì)胞最常見的蛋白轉(zhuǎn)譯后修飾方式之一,N-糖基化作為糖蛋白中最主要的糖基化類型,在許多生命活動中起重要作用,對糖蛋白N-糖鏈的定性及定量研究具有重要意義。常規(guī)N-糖基化分析策略多是將其從肽鏈上酶切游離后再分析,但N-糖鏈為多羥基醛類化合物,經(jīng)典反相色譜與紫外檢測方式對其分離分析較困難。針對這種情況,科學(xué)家多是通過柱前衍生法使糖鏈帶上紫外或熒光基團,增加檢測靈敏度。對近年來科學(xué)家分離分析游離N-糖鏈的方法做了歸納與總結(jié),其中毛細(xì)管電泳、高效液相色譜以及質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)在N-糖鏈的分離分析上有著巨大優(yōu)勢,對糖蛋白上N-糖的定性定量、結(jié)構(gòu)表征具有重要意義。與此同時應(yīng)進一步發(fā)展穩(wěn)定可靠的N-糖釋放、富集方法,并結(jié)合現(xiàn)代高效的分析手段,以及有針對性的N-糖解析措施,以期為N-糖基化高通量、高準(zhǔn)確性的分析提供依據(jù)。