水稻硝態氮響應的酵母雙雜交文庫的構建與分析

摘要：酵母雙雜交是在真核生物酵母細胞體內研究蛋白質之間相互作用的一種高效分子生物學技術。為了研究水稻氮吸收與利用的分子調控機理,以硝態氮(5 mmol/L KNO3)誘導處理的水稻 9311幼苗為材料,構建水稻在高氮響應條件下的酵母雙雜交cDNA文庫。實驗結果表明,構建的氮響應文庫滴度為1.7×10^8 cfu/mL,文庫的重組率為95%,插入片段大小在 500~1500 bp之間。從文庫中隨機挑選10個單克隆,測序后通過NCBI比對分析結果顯示9個克隆可以從水稻基因庫中找到對應序列。文庫的構建將為水稻氮素吸收與利用的分子調控機理研究提供幫助。