新生Wistar大鼠心肌細胞的分離培養(yǎng)與鑒定

摘要：本實驗取新生24h內的Wistar大鼠心肌組織，無菌剪碎后采用胰酶消化法分離細胞，用含20％胎牛血清的DMEM／F12培養(yǎng)基培養(yǎng)，逐日在倒置相差顯微鏡下觀察。結果于培養(yǎng)后48h即可觀察到部分細胞搏動；72h后，細胞逐漸展開，搏動頻率在60-70次／min，從而初步確立培養(yǎng)的細胞為心肌細胞；進一步采用心肌細胞特異性蛋白（cTnT）抗體和儀肌動蛋白（d—actin）單克隆抗體分別對培養(yǎng)的心肌細胞進行免疫熒光及免疫組織化學鑒定，結果均呈陽性。