循環內皮微粒相關microRNA在巨噬細胞炎性反應誘發小鼠動脈粥樣硬化發生的機制

摘要：目的研究循環內皮微粒(EMPs)相關microRNA在巨噬細胞炎性反應誘發動脈粥樣硬化(AS)發生的作用機制。方法 SPF級雄性ApoE-/-小鼠206只,對照組50只,實驗組隨機分為動脈粥樣硬化模型(AS模型)組、NC-miRNA組和miRNA-19b抑制劑組,每組52只。采用油紅染色對AS病變小鼠的組織學進行觀察,計算斑塊面積相對比例;檢測生化指標的表達水平,主要包括小鼠血清高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、膽固醇(TC)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)和甘油三酯(TG);ELISA檢測血管炎癥因子腫瘤壞死因子(TNF-α)、白細胞介素1(IL-1)、IL-6和IL-10的變化;Western blot檢測凋亡相關蛋白B細胞淋巴瘤因子(Bcl-2)、細胞凋亡的標志蛋白PARP降解產物(cleaved-PARP)和B細胞淋巴瘤因子相關X蛋白(Bax)表達的變化,實時熒光定量PCR檢測miR-19b表達;流式細胞法檢測巨噬細胞的凋亡率。結果 miRNA-19b抑制劑組可減少由于AS引起的血管厚度增加,減少AS斑塊面積比例;使血脂中的TC、TG和LDL-C水平降低,HDL-C水平則有升高;Bax、cleaved-PARP促相關的凋亡蛋白表達量下調,同時Bcl-2抗凋亡蛋白表達上調;血管中促炎癥因子IL-1、IL-6和TNF-α水平降低,抗炎癥因子IL-10的水平則升高;同時使血管內巨噬細胞的凋亡率下降。結論 EMPs相關miRNA-19b的存在可以減少巨噬細胞的凋亡,并且通過上調促炎因子促進組織周圍炎癥的發生,進而促進AS的發展進程。