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    miRNA-301a-3p調(diào)控結(jié)直腸癌對(duì)5-氟尿嘧啶敏感性的機(jī)制研究

    王龍飛; 彭洪; 蘇強(qiáng); 杜經(jīng)緯; 張濤; 田云鴻 南充市中心醫(yī)院藥學(xué)部; 四川南充637000; 南充市中心醫(yī)院中西醫(yī)結(jié)合肛腸科; 四川南充637000; 南充市中心醫(yī)院耳鼻喉科; 四川南充637000; 南充市中心醫(yī)院消化內(nèi)科; 四川南充637000; 南充市中心醫(yī)院胃腸外科; 四川南充637000
    • pten蛋白
    • akt蛋白
    • 結(jié)直腸癌

    摘要:目的探討miRNA-301a-3p對(duì)結(jié)直腸癌細(xì)胞HCT-8化療敏感性的影響及可能的作用機(jī)制。方法采用CCK-8法檢測(cè)結(jié)直腸癌親本細(xì)胞株HCT-8和對(duì)5-氟尿嘧啶(5-FU)耐藥細(xì)胞株HCT-8/FU化療敏感性,RT-PCR法檢測(cè)miRNA-301a-3p和PTEN基因在HCT-8和HCT-8/FU細(xì)胞中的表達(dá)。在HCT-8/FU細(xì)胞中轉(zhuǎn)染miRNA-301a-3p inhibitor,CCK-8檢測(cè)化療敏感性。通過生物信息學(xué)軟件分析miRNA-301a-3p的下游靶基因,雙瑩光素酶報(bào)告基因法進(jìn)行驗(yàn)證。觀察抑制PTEN的表達(dá)對(duì)化療敏感性的影響,并檢測(cè)抑制miRNA-301a-3p表達(dá)后對(duì)PTEN、AKT及pAKT蛋白表達(dá)的影響。結(jié)果 HCT-8/FU細(xì)胞株的化療敏感性明顯低于HCT-8細(xì)胞株。miRNA-301a-3p在HCT-8/FU細(xì)胞中的表達(dá)明顯高于HCT-8細(xì)胞,但PTEN在HCT-8/FU細(xì)胞中的表達(dá)則明顯低于HCT-8細(xì)胞。miRNA-301a-3p inhibitor抑制HCT-8/FU細(xì)胞中miRNA-301a-3p的表達(dá)后,HCT-8/FU細(xì)胞化療敏感性明顯增高。PTEN是miRNA-301a-3p的靶基因。抑制PTEN表達(dá)可降低HCT-8/FU細(xì)胞化療敏感性,抑制miRNA-301a-3p表達(dá)可提高PTEN蛋白表達(dá),并下調(diào)pAKT蛋白表達(dá)。結(jié)論下調(diào)HCT-8/FU細(xì)胞株中miRNA-301a-3p的表達(dá)可提高細(xì)胞的化療敏感性,其機(jī)制可能與miRNA-301a-3p/PTEN/AKT信號(hào)通路有關(guān)。

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