小反芻獸疫病毒間接化學發光抗體檢測方法的建立與優化

摘要：構建了原核表達質粒pET-28a-N,經原核表達純化獲得小反芻獸疫病毒N蛋白。將純化的小反芻獸疫病毒N蛋白與對應的酶標二抗配對,通過對各個反應條件的優化建立了間接化學發光抗體檢測方法。通過對血清樣本的檢測,對該方法的敏感性、特異性、重復性、符合率進行了評價。試驗結果顯示:N蛋白最適包被濃度為0.5μg/mL,最適包被條件為4℃24 h;酶標二抗最適工作濃度為1∶2000。特異性試驗證明,該方法與羊常見病毒的抗體陽性血清沒有交叉反應。通過檢測大量小反芻獸疫病毒抗體陰、陽型血清,確定了科學的判定標準。