摘要：目的改良SpragueDawley(SD)新生大鼠視網(wǎng)膜Müller細(xì)胞培養(yǎng)方法。方法取新生1~2d的SD,分2d完成視網(wǎng)膜Müller細(xì)胞的提取,第1天將眼球浸泡于含體積分?jǐn)?shù)1%雙抗的無(wú)血清高糖達(dá)爾伯克改良伊戈?duì)柵囵B(yǎng)基(DMEM)中,置于37℃、含體積分?jǐn)?shù)5%CO2的培養(yǎng)箱內(nèi)過(guò)夜;第2天,去培養(yǎng)基,以2.5g·L^-1胰蛋白酶消化眼球1h,分離視網(wǎng)膜組織,加入含體積分?jǐn)?shù)1%雙抗和體積分?jǐn)?shù)10%胎牛血清的高糖DMEM培養(yǎng)基,制備細(xì)胞懸液接種培養(yǎng);24h后換液,6~8d后傳代,傳至第4代,細(xì)胞免疫熒光染色法鑒定Müller細(xì)胞純度。結(jié)果Müller細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)良好,細(xì)胞體寬大,細(xì)胞質(zhì)豐富,細(xì)胞核呈圓形或橢圓形,無(wú)神經(jīng)元共生長(zhǎng),Müller細(xì)胞純度>95%。結(jié)論改良的SD新生大鼠視網(wǎng)膜Müller細(xì)胞培養(yǎng)方法操作簡(jiǎn)單,細(xì)胞純度高。