一種改良的Sprague Dawley新生大鼠視網膜Müller細胞培養方法

摘要：目的改良SpragueDawley(SD)新生大鼠視網膜Müller細胞培養方法。方法取新生1~2d的SD,分2d完成視網膜Müller細胞的提取,第1天將眼球浸泡于含體積分數1%雙抗的無血清高糖達爾伯克改良伊戈爾培養基(DMEM)中,置于37℃、含體積分數5%CO2的培養箱內過夜;第2天,去培養基,以2.5g·L^-1胰蛋白酶消化眼球1h,分離視網膜組織,加入含體積分數1%雙抗和體積分數10%胎牛血清的高糖DMEM培養基,制備細胞懸液接種培養;24h后換液,6~8d后傳代,傳至第4代,細胞免疫熒光染色法鑒定Müller細胞純度。結果Müller細胞貼壁生長良好,細胞體寬大,細胞質豐富,細胞核呈圓形或橢圓形,無神經元共生長,Müller細胞純度>95%。結論改良的SD新生大鼠視網膜Müller細胞培養方法操作簡單,細胞純度高。