摘要：目的:優(yōu)化人外周血淋巴細(xì)胞增殖試驗條件;考察動物源材料的Gal抗原含量與淋巴細(xì)胞增殖效應(yīng)的相關(guān)性;并比較人外周血淋巴細(xì)胞與小鼠脾臟淋巴細(xì)胞增殖試驗對動物源材料的敏感性差異。方法:從細(xì)胞接種量,陽性對照(刀豆球蛋白A,Con A)的工作濃度與細(xì)胞培養(yǎng)時間,優(yōu)化人外周血淋巴細(xì)胞增殖試驗的最佳條件;利用優(yōu)化的試驗方法,通過人外周血淋巴細(xì)胞與動物源性材料的(牛跟腱或由牛跟腱純化的膠原蛋白海綿)勻漿液或浸提液共培養(yǎng),考察材料的不同前處理方式對人外周血淋巴細(xì)胞增殖的影響;參考標(biāo)準(zhǔn)YY/T 1561-2017,檢測材料勻漿液或浸提液的Gal抗原含量,分析其抗原含量與淋巴細(xì)胞增殖效應(yīng)的相關(guān)性;同時參考標(biāo)準(zhǔn)YY/T 1465.1-2016,考察材料勻漿液與浸提液對小鼠脾臟淋巴細(xì)胞增殖效應(yīng)的影響,并對比分析對動物源材料的敏感性差異。結(jié)果:人外周血淋巴細(xì)胞增殖試驗最佳反應(yīng)條件經(jīng)優(yōu)化確定為:細(xì)胞接種量為1×10^5,陽性對照(Con A)的終濃度選擇5~10μg·mL^-1,培養(yǎng)時間為4 d。人外周血淋巴細(xì)胞與膠原蛋白海綿(勻漿組與浸提液組)共培養(yǎng)后,樣品組與正常細(xì)胞對照組相比不存在明顯差異;與牛跟腱勻漿液共培養(yǎng)后,與正常細(xì)胞對照組相比不存在顯著性差異。膠原蛋白海綿(勻漿組與浸提液組)對小鼠脾臟淋巴細(xì)胞均無明顯增殖效應(yīng)。牛跟腱勻漿液在5倍稀釋與50倍稀釋后,對小鼠脾臟淋巴細(xì)胞均有明顯增殖效應(yīng)(增殖率為143.20%和128.71%)。牛跟腱勻漿液的Gal抗原含量為(3.98±1.06)×10^13個·mg^-1、膠原蛋白海綿勻漿液為(2.24±0.60)×10^13個·mg^-1、膠原蛋白海綿浸提液為(1.89±0.64)×10^13個·mg^-1。結(jié)論:淋巴細(xì)胞增殖效應(yīng)與動物源性生物材料中殘留Gal抗原含量的正向相關(guān)性不強。與小鼠脾臟淋巴細(xì)胞增殖試驗相比,采用人外周血淋巴細(xì)胞增殖試驗評價含Gal抗原的動物源性生物材料細(xì)?