日本結縷草ZjNAC1的克隆、轉錄激活活性、亞細胞定位及表達分析

摘要：采用RACE技術從日本結縷草中克隆得到ZjNAC1轉錄因子(GenBank No. MH428376),其開放閱讀框為945bp,編碼314個氨基酸。ZjNAC1編碼的蛋白在N端有1個典型的NAM保守結構域,屬于NAC轉錄因子家族。通過染色體步移的方法,獲得ZjNAC1基因ATG上游1635bp序列,分析發現其包含響應脫落酸(ABA)、茉莉酸甲酯(MeJA)及逆境脅迫的作用元件。構建pGBKT7-ZjNAC1載體,轉化Y2HGold酵母感受態細胞,發現ZjNAC1具有轉錄激活活性。農桿菌介導的35S-ZjNAC1-YFP載體注射本生煙草葉片瞬時表達結果顯示,ZjNAC1定位于細胞核。實時熒光定量結果表明,ZjNAC1在日本結縷草根中表達量最高;此外,ZjNAC1的表達受10μmol/L MeJA和20%PEG4000處理的誘導,但受200μmol/L乙烯(ET)、10μmol/L ABA和300mmol/L NaCl處理的抑制。