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    首頁 > 期刊 > 自然科學與工程技術 > 醫藥衛生科技 > 中藥學 > 中國海洋藥物 > 高效液相色譜-紫外/質譜評價海洋天然產物體外抑制環氧合酶2活性方法研究 【正文】

    高效液相色譜-紫外/質譜評價海洋天然產物體外抑制環氧合酶2活性方法研究

    史倩; 陳軍輝; 張大海; 鄭立; 李先國 齊魯工業大學(山東省科學院)海洋儀器儀表研究所; 山東青島266061; 自然資源部第一海洋研究所海洋活性物質與現代分析技術重點實驗室; 山東青島266061; 中國海洋大學化學化工學院; 山東青島266100
    • 環氧合酶2
    • 高效液相色譜紫外檢測
    • 抑制劑篩選
    • 海洋天然產物

    摘要:目的建立基于高效液相色譜-紫外(HPLC-UV)和高效液相色譜-多級離子阱質譜分析(HPLC-ITMS/MS)的海洋天然產物體外抑制COX-2酶的活性評價方法。方法采用Agilent Poroshell 120C18色譜柱,以乙腈-0.05%磷酸水溶液為高效液相色譜流動相,二元等度洗脫,流速為0.4 mL·min^-1,檢測波長210nm,進樣量10μL;質譜條件下,流動相改為乙腈-0.05%乙酸水溶液,進樣量為1μL,選用ESI離子源,負離子電離模式,噴霧氣壓35psi,干燥氣(N2)流速12L·min^-1,干燥氣溫度350℃。結果建立的高效液相色譜-紫外和高效液相色譜-多級離子阱質譜法精密度和穩定性良好,對比兩者測定酶底物花生四烯酸的適用性顯示,基于HPLC-UV的評價方法適用極性較大的天然產物粗提物;HPLC-IT-MS/MS法則因其抗干擾能力強,適用于復雜體系中極性較弱的活性物質的檢測。以建立的HPLC-UV和HPLC-IT-MS/MS方法對海洋天然產物的COX-2酶抑制活性進行評價,天然產物粗提物中黃海葵Anthopleura lanthogrammica Berkly乙醇粗提物和彎孢菌Curvularia lunata strain L2744發酵液粗提物對COX-2酶抑制作用較為明顯,抑制率分別為70.1%和25.48%。結論建立的評價方法具有適用性強、結果可靠等優點,有望為天然產物粗提物中COX-2酶抑制劑體外篩選提供技術參考。

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