摘要：目的:研究淫羊藿次苷Ⅱ(IcarisidⅡ,ICSⅡ)對(duì)體外培養(yǎng)的比格犬頜骨間充質(zhì)干細(xì)胞(alveolar bone-derived stem cells,AMSCs)增殖與成骨分化的影響。方法:取比格犬頜骨骨片,體外分離培養(yǎng)出dAMSCs,傳代至第4代,做多向分化鑒定。以10^-5、10^-6、10^-7、10^-8、10^-9mol/L濃度的ICSⅡ刺激d AMSCs后,取1、3、5、7 d的細(xì)胞,分別用CCK-8及堿性磷酸酶(ALP)試劑盒檢測(cè)dAMSCs的增殖及ALP活性;用10^-6 mol/L的ICSⅡ處理dAMSCs后14 d,作ALP染色,21 d時(shí)作茜素紅染色,以判斷ICSⅡ?qū)?xì)胞分化及礦化能力的影響。在成骨誘導(dǎo)及10^-6mol/L的ICSⅡ藥物誘導(dǎo)第4、8天后,用蛋白免疫印跡試驗(yàn)分析成骨相關(guān)蛋白OSX、Runx-2及OCN的表達(dá)量;在誘導(dǎo)第6天時(shí),利用RT-PCR分析成骨相關(guān)基因OSX、bFGF、Runx-2及OCN的表達(dá)情況。采用SPSS 22.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果:原代培養(yǎng)的dAMSCs貼壁生長(zhǎng),呈梭形,具備多向分化能力;ICSⅡ在不同濃度下均可促進(jìn)dAMSCs的增殖,其ALP活性亦有提高,且在實(shí)驗(yàn)濃度時(shí)可觀察到鈣結(jié)節(jié)形成。各成骨相關(guān)基因在ICSⅡ誘導(dǎo)后表達(dá)量有不同程度增加,均高于完全培養(yǎng)基組。隨著時(shí)間延長(zhǎng),加藥組Runx-2蛋白表達(dá)量有所下降,OCN蛋白表達(dá)量逐漸增多,與對(duì)照組差距加大;OSX的蛋白表達(dá)量雖高于對(duì)照組,但無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。結(jié)論:ICSⅡ可促進(jìn)dAMSCs的增殖及成骨分化。