斯氏按蚊MyD88基因生物信息學分析及其在抗約氏瘧原蟲感染中的作用

摘要：目的對斯氏按蚊MyD88基因進行生物信息學分析,并研究其在抗約氏瘧原蟲感染中的作用。方法首先,通過VectorBase數據庫獲取斯氏按蚊MyD88基因cDNA序列,并利用VectorNTI、DNAMAN等軟件對MyD88基因cDNA序列進行生物信息學分析。然后,根據MyD88的cDNA序列設計Real-time PCR引物,提取斯氏按蚊總RNA,通過反轉錄合成cDNA,利用Real-time PCR方法檢測MyD88基因在蚊各個生活史階段轉錄水平情況及其在約氏瘧原蟲感染后的轉錄水平變化。結果斯氏按蚊MyD88基因位于斯氏按蚊KB664619號染色體155 163~158 066 bp的反義鏈上,包含兩個外顯子,其c DNA全長1 383 bp,編碼460個氨基酸。系統發育樹結果顯示,斯氏按蚊與大劣按蚊和岡比亞按蚊系統發育的距離近,其氨基酸序列同源性達79%。對斯氏按蚊各時期MyD88基因轉錄水平的研究結果顯示,吸食正常血和感染血均能夠上調MyD88的轉錄,吸血后3 d和5 d吸感染血組MyD88基因轉錄水平上調明顯,顯著高于正常血組和未吸血組。結論本研究證實了Toll信號通路中的MyD88基因在蚊抗瘧原蟲感染的天然免疫中發揮了重要作用,在感染后3 d時作用明顯。