細粒棘球絳蟲重組GST蛋白的原核表達及生物信息學分析

摘要：目的原核表達細粒棘球絳蟲(Echinococcus granulosus,Eg)谷胱甘肽S-轉移酶(Glutathione S-Transferase,GST)蛋白,分析其結構與功能特點。方法將EgGST基因亞克隆于PET-28b表達載體,轉化至大腸埃希菌BL21中,用異丙基-β-D-硫代半乳糖苷誘導蛋白表達;蛋白經Ni柱純化后,用SDS-PAGE及Western-blot進行鑒定;并運用DNAstar軟件及在線軟件預測分析其結構與功能特點。結果重組EgGST蛋白以可溶性形式在大腸埃希菌中高效表達,其相對分子質量為45 000;該蛋白潛在B細胞表位區域為aa 26~33,89~97,116~124,147~158,201~215;潛在T細胞表位區域為aa 12~20,122~120,79~87,61~69,29~37,62~70。結論成功獲得可溶性重組EgGST蛋白,該蛋白具有一定的免疫原性,具有成為細粒棘球蚴病疫苗分子潛力。