拓撲異構酶Ⅰ抑制劑對耐阿霉素淋巴瘤細胞株殺傷和誘導凋亡作用的研究

摘要：目的 研究拓撲異構酶Ⅰ抑制劑對耐阿霉素淋巴瘤細胞株（L1210/ADM）的殺傷和誘導凋亡的作用.方法 采用噻唑藍（MTT法）、鈣依賴性磷脂結合蛋白（Annexin V）染色、梯狀DNA電泳與細胞形態學觀察等方法分析不同濃度（0.05、0.10、0.20、0.40μmol/L）拓撲異構酶Ⅰ抑制劑對L1210/ADM細胞的殺傷和凋亡作用,采用半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶（Caspase）8、Caspase-3抑制劑IETD-fmk、DEVD-CHO分析拓撲異構酶Ⅰ抑制劑介導的靶細胞殺傷和凋亡作用與Caspase的關系.結果 0.10 μmol/L拓撲異構酶Ⅰ抑制劑對靶細胞株的殺傷作用,與對照組和0.05 μmol/L組之間差異均有統計學意義（均P＜0.05）.加用Caspase酶特異性抑制劑3組各時間點的靶細胞存活率均高于單用拓撲異構酶Ⅰ抑制劑組,差異均有統計學意義（均P＜0.05）.靶細胞株經拓撲異構酶Ⅰ抑制劑處理后,部分靶細胞株出現了細胞凋亡;加用Caspase酶特異性抑制劑組中,有部分細胞死亡,但無凋亡小體形成,死亡細胞均為錐蟲藍染色.經拓撲異構酶Ⅰ抑制劑處理的靶細胞株大部分細胞出現胞體解離,并彼此黏附成簇狀的、錐蟲藍拒染的凋亡小體,靶細胞株DNA電泳表現為特征性梯狀圖譜;加入Caspase酶特異性抑制劑的各組可以看到阻斷了梯狀DNA的產生.結論 拓撲異構酶Ⅰ抑制劑對L1210/ADM細胞株具有較強的殺傷和誘導凋亡作用,其機制可能涉及Caspase-8、Caspase-3的有序性活化.