腎素血管緊張素系統(tǒng)在晚期糖基化終產(chǎn)物改變腎小球內(nèi)皮細胞通透性中的作用

摘要：目的探討晚期糖基化終產(chǎn)物（AGE）對大鼠腎小球內(nèi)皮細胞（rGEnC）緊密連接的影響及激活細胞內(nèi)腎素血管緊張素系統(tǒng)（RAS）在其中的作用。方法采用原代培養(yǎng)的rGEnC，予不同濃度AGE（20、40、80mg／L）分別作用6h、12h和24h，采用跨內(nèi)皮細胞電阻抗和異硫氰酸熒光素標記的牛血清白蛋白濾過率觀察通透性的變化；Western印跡檢測晚期糖基化終產(chǎn)物受體（RAGE）、緊密連接蛋白[occludin、claudin-5、連接黏附分子A（JAM—A）和閉合小環(huán)蛋白1（ZO-1）]和細胞RAS組分[血管緊張素原、腎素和血管緊張素Ⅱ（AngⅡ）1型受體（AT1）1蛋白表達量的變化；免疫熒光技術(shù)顯示緊密連接的完整性；紫外光法和酶免疫分析技術(shù)測定細胞內(nèi)外血管緊張素轉(zhuǎn)化酶（ACE）活性及AngⅡ水平。結(jié)果AGE可引起內(nèi)皮細胞通透性、RAGE表達量、ACE活性、AngⅡ濃度和AT1表達量的升高，occludin、claudin-5和JAM-A表達量的下降。加入抗RAGE抗體（100mg／L）預(yù)處理后，上述AGE作用被阻斷。AGE可引起上述緊密連接蛋白在細胞連接處的中斷。予卡托普利（1mmol／L）或纈沙坦（10μmol／L）預(yù)處理可部分阻斷AGE上述效應(yīng)。結(jié)論AGE可通過上調(diào)RAGE表達，激活細胞內(nèi)腎素血管緊張素系統(tǒng)，破壞腎小球內(nèi)皮細胞緊密連接，導(dǎo)致其通透性的升高。