首頁(yè) > 期刊 > 自然科學(xué)與工程技術(shù) > 農(nóng)業(yè)科技 > 植物保護(hù) > 植物保護(hù)學(xué)報(bào) > 沙蔥螢葉甲表皮蛋白基因GdAbd的克隆及對(duì)溫度脅迫的響應(yīng) 【正文】
摘要:為揭示沙蔥螢葉甲Galeruca daurica表皮蛋白基因GdAbd在其應(yīng)對(duì)溫度脅迫中的作用,采用RACE技術(shù)克隆表皮蛋白基因GdAbd的cDNA全長(zhǎng)序列,并進(jìn)行生物信息學(xué)分析;利用實(shí)時(shí)熒光定量(qPCR)技術(shù)比較GdAbd經(jīng)不同溫度處理1 h及25℃恢復(fù)30 min后在沙蔥螢葉甲2齡幼蟲(chóng)體內(nèi)的表達(dá)水平。結(jié)果表明,GdAbd基因全長(zhǎng)708 bp(GenBank登錄號(hào):MG874710),開(kāi)放閱讀框?yàn)?77 bp,編碼158個(gè)氨基酸;蛋白預(yù)測(cè)分子量為16.98 kD,等電點(diǎn)為4.26;編碼蛋白具有典型的表皮蛋白R(shí)&R保守結(jié)構(gòu)域,屬于RR-2亞族;具有1個(gè)跨膜結(jié)構(gòu)和1個(gè)信號(hào)肽。同源序列比對(duì)和系統(tǒng)發(fā)育分析表明,GdAbd與馬鈴薯甲蟲(chóng)Leptinotarsa decemlineata SgAbd-4的同源性最高,氨基酸序列一致性達(dá)50.63%。qPCR檢測(cè)結(jié)果表明,與25℃對(duì)照相比,GdAbd基因表達(dá)水平在-10~5℃低溫脅迫時(shí)未發(fā)生顯著變化,而在35℃高溫脅迫時(shí)發(fā)生顯著上調(diào);-10、-5和0℃低溫脅迫后25℃恢復(fù)30 min可誘導(dǎo)GdAbd顯著上調(diào)表達(dá),但5℃低溫和35℃高溫脅迫處理與對(duì)照差異不顯著。說(shuō)明短時(shí)低溫脅迫不能顯著影響GdAbd表達(dá),但脅迫后回溫可誘導(dǎo)其上調(diào)表達(dá)。
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